Una valoración UV cuenta todo lo que absorbe a una longitud de onda. La HPLC separa antes los compuestos y cuenta los que nombra. Las dos cifras responden a preguntas distintas.
Llegan dos ofertas de lo que parece el mismo extracto. Una indica el contenido de activos por UV, la otra por HPLC, y la cifra UV es claramente la más alta. Ninguna tiene por qué estar equivocada, e incluso el material puede ser el mismo. Los dos métodos cuentan cosas distintas, y cada uno expresa su resultado en función de una sustancia concreta.
Estas son seis comprobaciones que conviene hacer antes de comparar dos cifras de valoración, o de comparar un certificado con el resultado de su propio laboratorio. Se apoyan en la guía europea sobre medicamentos a base de plantas, en la guía internacional sobre la validación de métodos analíticos y en estudios publicados; el ejemplo procede de nuestras propias especificaciones. Nuestros artículos anteriores abarcaban la especificación, la relación de extracción, el certificado de análisis, el disolvente y el soporte, y las filas de contaminantes; este se centra en el método de valoración.
01 / EL MÉTODO
¿Indica la fila de valoración el método?
Una cifra de valoración pertenece al método que la produjo. La guía europea sobre medicamentos a base de plantas lo incorpora a su definición de especificación, «una lista de ensayos, referencias a procedimientos analíticos y biológicos, y criterios de aceptación adecuados», y la conformidad significa que el material, «cuando se analiza con arreglo a los procedimientos analíticos indicados, cumplirá los criterios de aceptación indicados».1
En una especificación, el método suele ser una palabra breve después de la cifra: UV, HPLC u otra técnica. Una fila que no lo indica está incompleta. Una revisión de 2023 de autores del American Botanical Council y de organizaciones colaboradoras señala que los resultados de las valoraciones espectrofotométricas «son a veces los únicos datos sobre la composición química de un ingrediente botánico que se facilitan en un certificado de análisis», y añade que declarar la metodología en que se basa un resultado cuantitativo «debería convertirse en práctica estándar del sector».2
Compruebe: que la fila de valoración nombra el método y que la especificación, el presupuesto y el certificado nombran todos el mismo.
02 / UV
¿Qué cuenta una cifra UV?
En una especificación, UV significa espectrofotometría ultravioleta-visible. Se disuelve el extracto, en muchas valoraciones un reactivo convierte los compuestos de interés en un producto coloreado, y se mide la luz que la disolución absorbe a una longitud de onda. Los compuestos de la disolución no se separan unos de otros, de modo que todo lo que absorbe a esa longitud de onda se suma al resultado.2
La revisión expone la consecuencia: las concentraciones obtenidas por espectrofotometría «suelen ser más altas que los resultados de otros métodos cuantitativos debido a la interferencia de analitos no objetivo que absorben a la longitud de onda de interés». Su ejemplo es el extracto de cardo mariano, en el que las concentraciones de silimarina «son generalmente de entre el 30 % y el 65 % por HPLC-UV y del 65–80 % con pruebas espectrofotométricas».2
La guía sobre la validación de métodos analíticos tiene un nombre para esta propiedad. La especificidad y la selectividad describen «el grado en que otras sustancias interfieren en la determinación de un analito».3 La guía europea sobre medicamentos a base de plantas toma una valoración ultravioleta-visible como ejemplo de valoración no específica.1 Una cifra UV es, por tanto, la cifra de un grupo de compuestos y debe leerse como tal.
Compruebe: para una cifra UV, qué grupo de compuestos debe cuantificar, y qué reactivo y qué longitud de onda utiliza el método.
03 / HPLC
¿Qué cuenta una cifra HPLC?
La HPLC, cromatografía de líquidos de alta resolución, separa el extracto disuelto en sus compuestos antes de medir nada. Los compuestos aparecen entonces como picos separados, y el método cuenta los picos que nombra. El detector situado tras la columna suele ser también una medición de luz: la revisión llama al detector UV/vis el «sistema de detección más utilizado».2 La principal diferencia entre los dos métodos es la separación.
Así, una cifra HPLC representa los compuestos que nombra el método, uno o varios sumados, y la especificación debería indicar cuáles. El informe de la Agencia Europea de Medicamentos sobre el mirtilo lo ilustra. Cita la definición que da la Farmacopea Europea del extracto seco refinado y estandarizado de fruto fresco de mirtilo: del 32,4 % al 39,6 % de antocianinas, «expresadas como cloruro de cianidina 3-O-glucósido». El cromatograma de esa valoración, tal como lo recoge el informe, muestra veinte picos identificados: quince antocianinas y cinco antocianidinas, es decir, sus formas sin azúcar.4
Un compuesto que el método no nombra no se cuenta, por mucha cantidad que haya de él en el extracto. Y algunos grupos solo pueden separarse en parte: para las proantocianidinas, señala la revisión, la separación de las moléculas más grandes «por medios cromatográficos es difícil; por ello, los proveedores suelen utilizar métodos espectrofotométricos para el análisis cuantitativo».2
Compruebe: para una cifra HPLC, los compuestos que se cuentan y si la cifra es su suma o la de un solo compuesto nombrado.
04 / EL PATRÓN
¿Frente a qué patrón y expresado como qué?
En una valoración de contenido, ninguno de los dos métodos lee un porcentaje directamente en la muestra. La señal se convierte en una cantidad por referencia a una sustancia concreta, que o bien se mide al mismo tiempo como patrón o bien está incorporada al cálculo; en la guía europea, los patrones de referencia se utilizan «para ensayos de identidad y pureza y para la asignación de contenido».1 El resultado se expresa entonces en función de una sustancia o un grupo concretos. La guía sobre la declaración de sustancias y preparados vegetales muestra la redacción: para la hoja de sen, heterósidos hidroxiantracénicos «calculados como senósido B»; para un extracto de hoja de ginkgo, flavonoides «expresados como heterósidos flavónicos».5 Lo que se nombra no es siempre lo que se midió: los métodos de la farmacopea para el ginkgo suelen determinar los flavonoides tras una hidrólisis ácida, que separa sus azúcares.2
Si se cambia el patrón de referencia, cambia la cifra, aunque el método y el material sigan siendo los mismos. En el caso de las proantocianidinas del arándano rojo medidas por una reacción de color, la valoración DMAC, un estudio indica que un patrón preparado a partir del propio arándano rojo «dio valores 2,2 veces superiores a los determinados con procianidina A2».6
También cuenta la forma de la molécula. El informe sobre el mirtilo describe un extracto con dos cifras, «36 % de antocianósidos, correspondientes a un 25 % de antocianidinas»: la segunda cifra cuenta las mismas moléculas sin su parte de azúcar.4
Nuestro extracto de arándano rojo es un ejemplo de declaración de valoración que indica su método y su patrón. Se especifica con un 30 % o más de proantocianidinas solubles totales (PAC) por BL-DMAC / UV-Vis, expresadas como equivalentes de procianidina A2. La valoración utiliza la procianidina A2 como patrón de referencia y mide la absorbancia a 640 nm; no determina la pureza de PAC de tipo A aisladas. Los resultados obtenidos con distintos métodos analíticos o patrones de calibración no son automáticamente comparables.
Compruebe: el patrón de referencia y en qué forma se expresa el resultado: un compuesto concreto, un grupo, o las moléculas con o sin su parte de azúcar.
05 / LA ELECCIÓN
¿Qué método conviene a la cifra que necesita?
La HPLC no es el mejor método en todos los casos. La guía de validación indica lo que debe demostrar la validación de cualquier método: «que el procedimiento analítico es adecuado para el fin previsto».3 Cuando el marcador es un compuesto, o unos pocos, un método de separación puede contarlos directamente. Cuando es todo un grupo que la cromatografía no puede resolver, lo habitual es recurrir a una valoración de grupo.2
Un estudio multilaboratorio de la valoración DMAC para el arándano rojo la describió como «una valoración espectrofotométrica sencilla, robusta y relativamente específica para las PAC totales en muestras de arándano rojo» y añadió que «puede no ser adecuada para comparar concentraciones entre distintos tipos de alimentos».7
Una valoración de grupo no puede mostrar de dónde proceden los compuestos: de las reacciones de color utilizadas para las proantocianidinas, la revisión dice que ninguna «puede distinguir entre PAC de diferentes fuentes».2 La guía europea sobre medicamentos a base de plantas prefiere un procedimiento específico siempre que sea posible; cuando está justificada una valoración no específica, remite a un segundo ensayo: «puede utilizarse una combinación de la valoración y un ensayo de identificación adecuado (p. ej., huella cromatográfica)».1 La guía de validación lo expresa en términos generales: la falta de especificidad «debe compensarse con otro u otros procedimientos analíticos de apoyo, salvo que esté debidamente justificado».3
Compruebe: que el método es adecuado para el marcador y, cuando se utiliza una valoración de grupo, qué ensayo de identificación la acompaña.
06 / SU LABORATORIO
¿Utilizará su propio ensayo el mismo método?
Una cifra solo puede confirmarse con el método que la produjo. Si su laboratorio analiza una entrega por HPLC frente a una especificación establecida por UV, su resultado no es un resultado frente a esa especificación, salga más bajo o más alto. No existe un factor general para convertir una cifra en la otra: la diferencia depende de qué más contenga el extracto y de cómo se exprese cada resultado.
Incluso con un mismo método, dos laboratorios no dan el mismo número. En el estudio multilaboratorio, cinco laboratorios analizaron las mismas once muestras de arándano rojo con el mismo método DMAC. Los resultados variaron de media un 4,1 % dentro de un mismo laboratorio y un 16,9 % entre laboratorios (intervalo del 8 % al 32 %), en términos de desviación estándar relativa.7
Por eso, conviene acordar tres cosas antes del pedido: el método, por su nombre y por referencia a una farmacopea o a un procedimiento escrito; el patrón de referencia; y la diferencia entre dos laboratorios que ambas partes aceptarán. Para los medicamentos con monografía de farmacopea, la guía europea indica qué método prevalece cuando se ha utilizado otro: «En caso de duda o de disputa, prevalecen los métodos de análisis de la Farmacopea».1 Cuando no se aplica ningún método de farmacopea, la especificación acordada tiene que cumplir esa función. Nuestro artículo sobre el certificado de análisis recoge las comprobaciones que conviene hacer cuando llega el certificado.
Compruebe: que su laboratorio y el laboratorio que hay detrás del certificado utilizan el mismo método y el mismo patrón de referencia, y qué diferencia entre sus resultados aceptan ambas partes.
QUÉ ENVIAR
Indique el método junto con su consulta
Cuando una cifra de valoración importa para su producto, indíquenos:
- el ingrediente y la parte de la planta, si se ofrece más de una;
- su aplicación prevista y su mercado de destino;
- el compuesto o grupo que necesita y el nivel objetivo;
- el método de valoración que utiliza su equipo de calidad y, cuando forma parte de la valoración, el patrón de referencia;
- si analizará usted mismo la entrega y con qué método;
- los documentos técnicos que necesita, como una ficha de especificaciones o un certificado de análisis;
- su nombre, su empresa y sus datos de contacto.
Un porcentaje de contenido de activos es más útil cuando se acompaña del método analítico y del patrón de referencia. Indíquenos estos requisitos junto con su nivel objetivo para que la especificación y el presupuesto describan el material que necesita su proyecto. Los intervalos de especificación de nuestro catálogo son valores de referencia, y la viabilidad, la disponibilidad y el precio se confirman con su presupuesto.
El ejemplo de producto procede de especificaciones y documentos técnicos de YOHOLIFE®. Este artículo no da otras cifras de valoración de nuestros ingredientes; el método y la especificación de un grado seleccionado se confirman al realizar su consulta. Las fuentes 1, 3, 4 y 5 se redactaron para medicamentos y se citan aquí por sus definiciones y ejemplos; la fuente 2 es una revisión de trabajos publicados; las fuentes 6 y 7 son estudios de una misma valoración para el arándano rojo y se leyeron en sus resúmenes publicados. Las fuentes se comprobaron el 12 de noviembre de 2026.
